VEGF重組質粒pcDNA/V的構建及其在大鼠急性心肌缺血模型中的表達
構建人血管內皮細胞生長因子(VEGF165)真核表達載體,并研究其在細胞水平和大鼠急性心肌梗死動物模型中的表達.利用RT-PCR方法,從人扁桃體組織中擴增人VEGF165基因,構建真核表達載體pcDNA/V.應用脂質體介導的基因轉移技術,將pcDNA/V轉染至人胚腎細胞(293細胞)中,經G418篩選獲得穩定表達的重組質粒細胞克隆.ELISA、Western blot檢測證實重組質粒pcDNA/V能在293細胞中高效表達外源VEGF基因,雞胚絨毛尿囊膜血管生成實驗證實表達產物具有促血管生成的活性.進一步的體內表達研究,建立大鼠急性心肌梗死模型,將重組質粒pcDNA/V、空質粒pcDNA3.1(+)分三點注射于梗死交界處心肌內,四周后取材.經免疫組化染色檢測,pcDNA/V組在梗死交界區有VEGF陽性表達;電鏡觀察顯示,pcDNA/V組在梗死交界處心肌細胞間有大量毛細血管內皮細胞增生.實驗結果表明:成功克隆了人VEGF165基因,構建了其真核表達載體.體內、外表達研究證實重組質粒的表達產物具有促血管生成的生物學活性,為VEGF基因治療缺血性心肌病的研究提供實驗基礎.
作 者： 王雅梅 劉冰 孫麗翠 閆豫東 司楊 祁雅慧 WANG Ya-Mei LIU Bing SUN Li-Cui YAN Yu-Dong SI Yang Qi Ya-Hui 作者單位： 首都醫科大學實驗中心,北京,100054 刊 名： 生物工程學報 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(2) 分類號： Q785 關鍵詞： 血管內皮細胞生長因子 真核表達載體 基因表達 心肌梗死【VEGF重組質粒pcDNA/V的構建及其在大鼠急性心肌缺血模型中的表達】相關文章：
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